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發(fā)布時間:2021-8-10 瀏覽次數(shù):873
D-熒光素鉀鹽產品描述
D-熒光素( D-Luciferin)是螢火蟲熒光素酶底物,其量子效率為 0.88,是魯米諾
( Luminol)的 20倍。反應原理為在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與 ATP反應,
接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結構并發(fā)出黃綠色的光。 Luciferin-luciferase發(fā)
光用于 ATP監(jiān)控以測定細胞活力以及細菌計數(shù)。D-熒光素鉀鹽也被廣泛用于報告基因
檢測。也可與小動物活體成像系統(tǒng)配套使用,用于標記 LUC基因后的體內活體熒光檢
測。
產品應用
(1) 高靈敏度 ATP分析
(2) 活體成像分析
(3) 體外分析
使用方法
1. 活體成像分析方法
A:用 DPBS(w/o Mg2+、Ca2+)配置 D-Luciferin工作液(15mg/mL),0.2 μm濾膜
無菌過濾。立即使用,或 分裝-20℃保存。
B:注射量:10μL/g的體重,如 10g重小鼠,注射 100μL 工作液(1.5 mg
D-Luciferin)。
C:腹腔注射10~15分鐘后,上機進行圖像分析。
2. 體外分析方法
A:用無菌水配置 200× 的D-Luciferin儲備液( 30mg/mL) ,立即使用,或 分裝
-20℃保存。
B:用預熱好的完全培養(yǎng)基稀釋D-Luciferin儲備液,配置工作液( 150μg/mL)。
C:去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基。
D:進行圖像分析前,向細胞中添加 1×的D-Luciferin工作液,進行圖像分析。
溫馨提示
·溶解 D-Luciferin時要完全。
·在圖像分析前,將細胞進行 37℃的短時間培養(yǎng)可以增加信號強度。