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FITC標(biāo)記抗體技術(shù)原理
發(fā)布時(shí)間:2020-4-24 瀏覽次數(shù):11221
FITC為黃色粉末,最大吸收光波長為490~495nm,最大發(fā)射光波長520~530nm,可呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,FITC 在冷暗干燥處可保存多年,是目前應(yīng)用最廣泛的熒光素。其主要優(yōu)點(diǎn)是人眼對黃綠色較為敏感,通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。
FITC分子中含有異硫氰基,當(dāng)FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應(yīng)時(shí),主要是蛋白質(zhì)上賴氨酸的R氨基與熒光素的硫碳胺鍵(thiocarbmide)結(jié)合,形成FITC蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物。
在熒光燈源紫外線或蘭紫光激發(fā)下產(chǎn)生黃綠色熒光,通過在熒光顯微鏡下觀察或流式細(xì)胞儀分析可對相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位或定量的檢測。